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常用消毒灭菌除菌器的使用

微生物存在于周围环境中,其中一些是致病微生物,从防止感染为起点,医疗工作者必须严格执行无菌操作,对所用物品和工作环境进行消毒灭菌,以确保正常的医学和科学研究。消毒和灭菌主要是通过物理和化学因素使微生物的主要代谢发生障碍,或细菌蛋白质变性凝固,或破坏其遗传物质,导致微生物死亡。 这里主要描述杀灭微生物的物理因素的几种方法,并相关设备的使用。

(一)高压蒸汽灭菌器

1、构造:高压蒸汽灭菌器是一种双层金属圆筒,在两层之间装水,外层坚固厚实,部有金属盖,盖旁附有螺旋,用以紧闭盖门,使蒸汽不能外溢,因此蒸汽压力增加,并且其温度也因此增加。

上海三申高压蒸汽灭菌器上装有排气阀门、安全活塞,以调节蒸汽压力。有温度计及压力表,以表示内部的温度和压力。上海三申高压灭菌器内装有带孔的金属搁板,用以放置要灭菌物体。

2、用法:加水至外筒内,被灭菌物品放入内筒。盖上灭菌器盖,拧紧螺旋使之密闭。灭菌器下用煤气或电炉等加热,同时打开排气阀门,排净其中冷空气,否则压力表上所示压力并非全部是蒸汽压力,灭菌将不完全。

待冷空气全部排出后(即水蒸气从排气阀中连续排出时),关闭排气阀。继续加热,待压力表渐渐升至所需压力时(一般是101.53 kPa,即15磅/英寸2,温度为121.3℃),调解炉火,保持压力和温度(注意压力不要过大,以免发生意外),维持15~30 min。灭菌时间到达后,停止加热,待压力降至零时,慢慢打开排气阀,排除余气,开盖取物。切不可在压力尚未降低为零时突然打开排气阀门,以免灭菌器中液体喷出。

当所有冷空气排出(即,水蒸气从排气阀连续排出)时,关闭排气阀。继续加热,直到压力表逐渐升至所需的压力(通常为101.53 kPa,或15磅/平方英寸,温度为121.3℃),调整火焰,保持压力和温度(注意压力不要太大,以免意外),保持15〜30分钟。 灭菌时间到达,停止加热,直到压力下降到零,缓慢打开排气阀,排除剩余气体,打开盖子取出物品。在压力尚未排尽时,不得打开排气阀,以免上海三申灭菌器中液体喷出。

高压蒸汽灭菌法为湿热灭菌法,其优点有三:一湿热灭菌时菌体蛋白容易变性,二湿热穿透力强,三蒸气变成水时可放出大量热增强杀菌效果,因此,它是效果好的灭菌方法。凡耐高温和潮湿的物品,如培养基、生理盐水、衣服、纱布、棉花、敷料、玻璃器材、传染性污物等都可应用本法灭菌。

目前已出现全自动电热高压蒸汽灭菌器,操作简单,使用安全。

(二)干热灭菌器(烤箱)

1、干热灭菌器由双铁板方形金属盒制成,内层外层有绝缘石棉板。大型炉子放置在箱体的下面,或者电线圈安装在箱体的壁上。内壁上有几个用于空气循环的孔,箱前面有铁门和玻璃门,箱内有金属箱板架数层。电炉的前部和底部装有温度调节器以保持所需的温度。

2、用法:将培养皿,吸管,试管等玻璃包装设备放入箱内,关门加热。当温度升至160〜170℃时,保持温度2 h,到达时间,停止加热,直至温度自然降至40℃以下,开门前提取,否则冷空气突然进入容易引起玻璃破裂; 空气溢出倾向于燃烧取出物的皮肤。一般的吸管,管,培养皿,凡士林,液体石蜡等都可以用这种方法灭菌。

(三)紫外线灯的使用

紫外线中波长为240~280nm的具有杀菌能力,其中265~266nm的杀菌作用强。医学上常使用紫外线灯产生紫外线进行消毒灭菌。常用的是水银灯,灯管由石英玻璃制成,管内充满压强为266 Pa的氩和几滴水银。其杀菌作用主要是因为DNA吸收了紫外线引起胸腺嘧啶形成二聚体,从而干扰了DNA的复制,轻则发生突变,重则导致死亡。紫外线杀菌力强而稳定,但穿透力弱,不能透过普通玻璃和有色纸张,因此,只适用于直接照射的物体表面消毒或空气消毒。

紫外波长240〜280nm具有杀菌能力,其中265〜266nm杀菌力强。医疗紫外线光通常用于产生紫外线消毒和灭菌。通常使用的是水银灯,灯由石英玻璃制成,管内填充有266Pa的氩气和几滴水银。其杀菌作用主要是因为DNA吸收了紫外线引起胸腺嘧啶形成二聚体,从而干扰了DNA的复制,轻则发生突变,重则导致死亡。紫外线杀菌强而稳定,但穿透力弱,不能通过普通玻璃和彩色纸,因此只能直接暴露于物体表面消毒或空气消毒。

使用方法:将涂有细菌的平皿放置在距紫外线60~100 cm处,直接受紫外线照射30 min后,37℃孵育24h后观察生长情况。

结果:紫外灯管直接照射处无菌生长,如用玻璃和黑纸遮盖,则有菌生长。

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