热力灭菌时牢靠而遍及运用的灭菌法，包含湿热灭菌和干热灭菌法。
1．湿热灭菌法
在相同的温度下，温热的灭菌效果比干热好，其因素有：①蛋白质凝结所需的温度与其含水量有关，含水量愈大，发作凝结所需的温度愈低。湿热灭菌的菌体蛋白质吸收水分，因较大同一温度的干热空气中易于凝结。②温热灭菌过程中蒸气放出大量潜热，加快进步湿度。因而湿热灭菌比干热所要温度低，如在同一温度下，则湿热灭菌所需时刻比干热短。③湿热的穿透力比干热大，使深部也能到达灭菌温度，故湿热比干热收效好。湿热灭菌法包含有：
（1）煮沸法：煮沸100℃，5分钟，能杀死通常细菌的繁衍体。很多芽胞需经煮潮5～6小时才逝世。水中参加2%碳酸钠，可进步其沸点达105℃。既可促进芽胞的杀灭，又能避免金属器皿生锈。煮沸法可用于饮水和通常器械（刀剪、注射器等）的消毒。
灭菌灭菌时可靠和广泛使用，包括干湿灭菌法。1湿热灭菌
（2）流转蒸汽灭菌法：运用100℃摆布的水蒸汽进行消毒，通常选用流转高压蒸汽灭菌器（其原理相当于中的蒸笼），加热15到39分钟，可杀死细菌繁衍体。消毒物品的包装不宜过大、过紧以利于蒸汽穿透。
（3）间歇灭菌法：运用反复多次的流转蒸汽，以到达灭菌的意图。通常用流转蒸汽灭菌器，100℃加热15～30分钟，可杀死其间的繁衍体；但芽胞尚有残存。取出后放37℃孵箱过夜，使芽胞发育成繁衍体，次日再蒸一次，如此接连三次以上。本法适用于不耐高温的养分物（如血清培养基）的灭菌。
（4）巴氏消毒法：运用热力杀死液体中的病原菌或通常的杂菌，一起不致严峻危害其质量的消耗办法。由巴斯德创用以消毒酒精类，故名。加温61.1～62.8℃半小时，或71.7℃15～30秒钟。常用于消毒牛奶和酒类等。
（5）高压蒸汽灭菌法：压力蒸汽灭菌是在专门的压力蒸汽灭菌器中进行的，是热力灭菌中运用遍及、效果牢靠的一种办法。其优点是穿透力强，灭菌效果牢靠，能杀灭所有微生物。
现在运用的压力灭菌器可分为两类：下排气式压力蒸汽灭菌器和预真空压力灭菌器。适用于耐高温、耐水物品的灭菌。 2．干热灭菌法
干热灭菌比湿热灭菌需求更高的温度与较长的时刻。
（1）干烤：运用干烤箱，加热160～180℃2小时，可杀死全部微生物，包含芽胞菌。要用于玻璃器皿、瓷器等的灭菌。
（2）炙烤和燃烧：炙烤是直接用火焰杀死微生物，适用于微生物实验室的接种针等不怕热的金属器件的灭菌。燃烧是彻底的消毒办法，但只限于处理抛弃的污染物品，如无用的衣物、纸张、废物等。燃烧应在专用的燃烧炉内进行。
(3) 红外线：红外线辐射是一种0.77～1000微米波长的电磁波,有较好的热效应,尤以1～10微米波长的热效应强。亦被以为一种干热灭菌。红外线由红外线灯泡发生,不需求经空气传导，所以加热速度快，但热效应只能在照耀到的外表发生，因而不能使一个物体的前后摆布均匀加热。红外线的灭菌效果与干热类似，运用红外线烤箱灭菌的所需温度和时刻亦同于干烤。多用于医疗器械的灭菌。
人受红外线照耀较长会感受双眼疲惫及头疼；长时间照耀会造成眼内损伤。因而，工作人少应戴能防红外线伤害的防护镜。
（4）微波：微波是一种波长为1毫米到1米摆布的电磁波，频率较高，可穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质，但不能穿透金属外表。微波能使介质内杂乱无章的极性分子在微波场的效果下，按波的频率往复运动，相互抵触和磨擦而发生热，介质的温度可随之增加，因而在较低的温度下能起到消毒效果。通常以为其灭菌机理除热效应以外，还有电磁共振效应，场努力效应等的效果。消毒中常用的微波有2450MHZ与915MHZ两种。微波照耀多用于食物加工。在医院中可用于检验室用品、非金属器械、无菌病室的食物食具、药杯及其它用品的消毒。
微波长时间照耀可导致双眼的晶状混浊、睾丸损伤和神经功能失调等全身性反应，因而有必要关好门后才开始操作。
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